- Raças
- Australian
- Inoculação
- 11/08/2021
- Inoculação via
- Seringa multi-esporos
- Assepsia (Inoculação)
- glovebox
- Terrário
- Caixa organizadora / in vitro
- Técnicas
- PFTek, terrário, in vitro
- Substratos
- Vermiculita
Água
Farinha de arroz integral (FAI)
Saudações!
Depois de alguns meses colocando os pezinhos na água pra "sentir o terreno", resolvi mergulhar nessa experiência. Estou desde janeiro juntando algumas informações sobre técnicas e os materiais. A primeira tentativa em Maio deste ano foi um desastre e acabei perdendo todo meu carimbo de esporos. Esperei um tempo na fé que se fosse para rolar, iria rolar. Aí um belo dia depois de uma conversa com um conhecido recebi uma doação de um carimbo de Australian. Agora não tinha mais desculpas e fui botar a mão na massa aproveitando o climinha que baixou um pouco, pois moro no nordeste e só quem conhece, conhece. Devido aos necessários e professores infortúnios da vida e da falta de prática, acabou que comecei dois cultivos em uma mesma semana, e resolvi fazer dois tipos de cultivos distintos. O primeiro, por motivos de negligencia na hora da feitura da seringa, será in vitro, e a classifico como um cultivo negligente (e é a que mais estou gostando rs). A segunda, mais cuidadosa e "experiente", será em bolos no copo, que depois vão para o terrário.
Acho indispensável trazer a tona minhas principais referências de estudos. Agradeço a todos e todas, mas principalmente a um Guia de cultivo feito em 2012, acredito. Baixei ele por aqui no começo do ano. E, claro, o tutorial postado por @ExPoro aqui mesmo: Tutorial - Atualização PF Tek 2020. Mas também não me limitei a eles. Busquei muitos diários, desde os completos, aos abandonados e que deram errado. Esse forúm é riquíssimo, parabéns a todo mundo. Bem feliz por poder contribuir uma "beirinha" com vocês.
Feita uma breve apresentação, vamos as datas e ações.
SERINGA - 09/08/2021
Materiais: seringa 20ml, água mineral, mini colher, carimbo, PP, materiais de higienização.
Usei uma mini colher e água mineral esterilizados 30 minutos na PP. Depois, sem esperar esfriar, pois o pessoal que mora comigo estava chegando e sempre que chegam usam a cozinha, então tive que fazer "rápido" pois o tempo que calculei não deu certo rs. Higienizei a glove e a bancada da cozinha com água sanitária + água e depois com álcool 70. Materiais também higienizados com álcool. Nessa fase, além deu não ter esperado a água esfriar e eu ter colocado os esporos na água quente, o outro problema foi o tamanho da glove box x tamanho da seringa + copo. Tive dificuldade em manter o copo emborcado e a seringa também, e a agulha entortou totalmente. Não tive outra escolha senão abrir a glovebox com o copo de água destampado, com os esporos já raspados dentro. Fiz o processo de puxar e soltar 3x. Puxei por último, embrulhei no papel alumínio e foi pra geladeira.
SUBSTRATO - 10/08/2021
Materiais: Vermiculita, água e arroz integral (FAI), potes, papel alumínio, fita isolante.
Para fazer o substrato, segui o padrão 2:1:1, primeiro a vermiculita, água, depois a farinha de arroz. O arroz ficou com alguns pedaços grosseiros, mas a maioria virou farinha. Testei a quantidade de água e achei bom, só saiu alguns pingos. Coloquei o substrato até a metade do pote e em seguida adicionei uma camada de vermiculita em cima. Só depois prestei atenção que a camada pode estar muito grossa para o processo in vitro. Esperemos.
Coloquei um pano no fundo da PP e deixei por 50m. Usei potes de azeitonas e oleo de coco, pois decidi fazer o experimento in vitro que tinha visto nesse mesmo dia. Pensei: já que minha seringa pode estar contaminada, então vou fazer um cultivo in vitro e deixar os copos para o bolo livres para mais um cultivo que eu pretendia fazer na mesma semana sem negligenciar a seringa. Fiz 3 potes desse substrato.
(foto tirada depois da inoculação)
INOCULAÇÃO E INCUBAÇÃO - 11/08/2021
Dessa vez o processo aconteceu num banheiro, uma área menor e sem ventilação. Mesmo assim, utilizei a glovebox. Abri a pp somente no banheiro e coloquei os potes na glovebox e inoculei sem muitos problemas. No mesmo dia, fiz um "ensaio" para treinar a mão e não rasgar muito o papel alumínio. Aprendi que se você coloca a seringa bem próxima da parede dos potes ou copos, fica mais difícil dela se movimentar. Fiz entre 5 furos em cada em prestar muita atenção nos ml.
Depois de inoculado, limpei a glovebox e deixei os potes lá mesmo para incubação, dentro do meu quarto em baixo de uma mesinha. A temperatura da minha cidade tem variado entre 21º de madruga e 28º no pingo do mêi-dia.

PRIMEIROS SINAIS DE VIDA
Dia 17/08/2021, 6 dias após inoculação.
Pote 3 - Mancha esbranquiçada no fundo do pote.


Dia 18/08/2021, 7 dias depois da inoculação.
Pote 1 - Mancha esbranquiçada nas laterais.



Minha duvida é saber se no pote 1 é o micélio ou outro tipo de organismo, pois me parece que o branco está quase transparente e tem um aspecto bem esfumaçado. O que acham pelas fotos?
O pote 2 até agora não deu sinal de vida, resumindo: nem tchum!
SERINGA 13/08/2021
Quase mesmo processo da anterior, sendo que dessa vez achei água mineral de copinho numa padaria da cidade vizinha e continuei a fazer no banheiro, não na cozinha. Usei o próprio copo e sua água para fazer a seringa, despejando o restante da água num copo que coloco na glovebox só para isso, assim, não necessito do potinho coletor que até hoje não encontrei ele estéril (só acho não-estéril em todas as farmácias). Dessa vez não coloquei a mini-colher na pp. Mas coloquei ela pra ferver na água por 10 minutos, depois lavei com água sanitária e água, depois álcool 70% para por dentro da caixa e ainda flambei com um isqueiro a ponta que ia usar para raspar o carimbo. Dessa vez deu tudo certo, consegui emborcar o copo sem nenhum problema e não tive que abrir a glovebox. Seringa 20ml e dessa vez enchi apenas 10ml. Foi pra geladeira, passou 3 dias.
SUBSTRATO, INOCULAÇÃO E INCUBAÇÃO 16 à 17/08/2021
Mesmo processo, só que dessa vez usei 4 copos americanos do médio. Não sei bem os mls, sou meio aéreo para mensurações rs. Substrato PFTEk, vermiculita, água e farinha arroz integral. Coloquei uma camada de vermiculita para finalizar e tapei com papel alumínio. Foi para pp 50min. Esperei até esfriar, virando a madrugada, de manhã inoculei no mesmo local (banheiro), sem demais complicações. Coloquei os copos juntos dos potes na caixa.

Essas duas etapas (seringa e inoculação) foram menos tensas que a experiência anterior e fiquei mais seguro pois não tive nenhum imprevisto.
EXPERIMENTAÇÃO NA FRUTIFICAÇÃO: Ainda estou "matutanto" se faço apenas o terrario ou uso 1 garrafa pet para ter a experiência de usá-la para comparar 3 modos diferentes de frutificação (in vitro, terrário em caixa e a garrafa pet).
Os potinhos no mesmo lugar, mas mantendo o distanciamento social e usando máscara, claro:


*Não tirei fotos dos primeiros procedimentos por motivos de achar que poderia me atrapalhar e o celular ser um vetor de contaminante.
**Não achei onde colocar o pré-fixo "Em andamento"
Até a próxima atualização!

Depois de alguns meses colocando os pezinhos na água pra "sentir o terreno", resolvi mergulhar nessa experiência. Estou desde janeiro juntando algumas informações sobre técnicas e os materiais. A primeira tentativa em Maio deste ano foi um desastre e acabei perdendo todo meu carimbo de esporos. Esperei um tempo na fé que se fosse para rolar, iria rolar. Aí um belo dia depois de uma conversa com um conhecido recebi uma doação de um carimbo de Australian. Agora não tinha mais desculpas e fui botar a mão na massa aproveitando o climinha que baixou um pouco, pois moro no nordeste e só quem conhece, conhece. Devido aos necessários e professores infortúnios da vida e da falta de prática, acabou que comecei dois cultivos em uma mesma semana, e resolvi fazer dois tipos de cultivos distintos. O primeiro, por motivos de negligencia na hora da feitura da seringa, será in vitro, e a classifico como um cultivo negligente (e é a que mais estou gostando rs). A segunda, mais cuidadosa e "experiente", será em bolos no copo, que depois vão para o terrário.
Acho indispensável trazer a tona minhas principais referências de estudos. Agradeço a todos e todas, mas principalmente a um Guia de cultivo feito em 2012, acredito. Baixei ele por aqui no começo do ano. E, claro, o tutorial postado por @ExPoro aqui mesmo: Tutorial - Atualização PF Tek 2020. Mas também não me limitei a eles. Busquei muitos diários, desde os completos, aos abandonados e que deram errado. Esse forúm é riquíssimo, parabéns a todo mundo. Bem feliz por poder contribuir uma "beirinha" com vocês.
Feita uma breve apresentação, vamos as datas e ações.
1º - CULTIVO IN VITRO
SERINGA - 09/08/2021
Materiais: seringa 20ml, água mineral, mini colher, carimbo, PP, materiais de higienização.
Usei uma mini colher e água mineral esterilizados 30 minutos na PP. Depois, sem esperar esfriar, pois o pessoal que mora comigo estava chegando e sempre que chegam usam a cozinha, então tive que fazer "rápido" pois o tempo que calculei não deu certo rs. Higienizei a glove e a bancada da cozinha com água sanitária + água e depois com álcool 70. Materiais também higienizados com álcool. Nessa fase, além deu não ter esperado a água esfriar e eu ter colocado os esporos na água quente, o outro problema foi o tamanho da glove box x tamanho da seringa + copo. Tive dificuldade em manter o copo emborcado e a seringa também, e a agulha entortou totalmente. Não tive outra escolha senão abrir a glovebox com o copo de água destampado, com os esporos já raspados dentro. Fiz o processo de puxar e soltar 3x. Puxei por último, embrulhei no papel alumínio e foi pra geladeira.
SUBSTRATO - 10/08/2021
Materiais: Vermiculita, água e arroz integral (FAI), potes, papel alumínio, fita isolante.
Para fazer o substrato, segui o padrão 2:1:1, primeiro a vermiculita, água, depois a farinha de arroz. O arroz ficou com alguns pedaços grosseiros, mas a maioria virou farinha. Testei a quantidade de água e achei bom, só saiu alguns pingos. Coloquei o substrato até a metade do pote e em seguida adicionei uma camada de vermiculita em cima. Só depois prestei atenção que a camada pode estar muito grossa para o processo in vitro. Esperemos.
Coloquei um pano no fundo da PP e deixei por 50m. Usei potes de azeitonas e oleo de coco, pois decidi fazer o experimento in vitro que tinha visto nesse mesmo dia. Pensei: já que minha seringa pode estar contaminada, então vou fazer um cultivo in vitro e deixar os copos para o bolo livres para mais um cultivo que eu pretendia fazer na mesma semana sem negligenciar a seringa. Fiz 3 potes desse substrato.

INOCULAÇÃO E INCUBAÇÃO - 11/08/2021
Dessa vez o processo aconteceu num banheiro, uma área menor e sem ventilação. Mesmo assim, utilizei a glovebox. Abri a pp somente no banheiro e coloquei os potes na glovebox e inoculei sem muitos problemas. No mesmo dia, fiz um "ensaio" para treinar a mão e não rasgar muito o papel alumínio. Aprendi que se você coloca a seringa bem próxima da parede dos potes ou copos, fica mais difícil dela se movimentar. Fiz entre 5 furos em cada em prestar muita atenção nos ml.
Depois de inoculado, limpei a glovebox e deixei os potes lá mesmo para incubação, dentro do meu quarto em baixo de uma mesinha. A temperatura da minha cidade tem variado entre 21º de madruga e 28º no pingo do mêi-dia.

PRIMEIROS SINAIS DE VIDA
Dia 17/08/2021, 6 dias após inoculação.
Pote 3 - Mancha esbranquiçada no fundo do pote.


Dia 18/08/2021, 7 dias depois da inoculação.
Pote 1 - Mancha esbranquiçada nas laterais.



Minha duvida é saber se no pote 1 é o micélio ou outro tipo de organismo, pois me parece que o branco está quase transparente e tem um aspecto bem esfumaçado. O que acham pelas fotos?
O pote 2 até agora não deu sinal de vida, resumindo: nem tchum!
2º - CULTIVO EM COPOS [PRETENDENTE A TERRÁRIO]
SERINGA 13/08/2021
Quase mesmo processo da anterior, sendo que dessa vez achei água mineral de copinho numa padaria da cidade vizinha e continuei a fazer no banheiro, não na cozinha. Usei o próprio copo e sua água para fazer a seringa, despejando o restante da água num copo que coloco na glovebox só para isso, assim, não necessito do potinho coletor que até hoje não encontrei ele estéril (só acho não-estéril em todas as farmácias). Dessa vez não coloquei a mini-colher na pp. Mas coloquei ela pra ferver na água por 10 minutos, depois lavei com água sanitária e água, depois álcool 70% para por dentro da caixa e ainda flambei com um isqueiro a ponta que ia usar para raspar o carimbo. Dessa vez deu tudo certo, consegui emborcar o copo sem nenhum problema e não tive que abrir a glovebox. Seringa 20ml e dessa vez enchi apenas 10ml. Foi pra geladeira, passou 3 dias.
SUBSTRATO, INOCULAÇÃO E INCUBAÇÃO 16 à 17/08/2021
Mesmo processo, só que dessa vez usei 4 copos americanos do médio. Não sei bem os mls, sou meio aéreo para mensurações rs. Substrato PFTEk, vermiculita, água e farinha arroz integral. Coloquei uma camada de vermiculita para finalizar e tapei com papel alumínio. Foi para pp 50min. Esperei até esfriar, virando a madrugada, de manhã inoculei no mesmo local (banheiro), sem demais complicações. Coloquei os copos juntos dos potes na caixa.

Essas duas etapas (seringa e inoculação) foram menos tensas que a experiência anterior e fiquei mais seguro pois não tive nenhum imprevisto.
EXPERIMENTAÇÃO NA FRUTIFICAÇÃO: Ainda estou "matutanto" se faço apenas o terrario ou uso 1 garrafa pet para ter a experiência de usá-la para comparar 3 modos diferentes de frutificação (in vitro, terrário em caixa e a garrafa pet).
Os potinhos no mesmo lugar, mas mantendo o distanciamento social e usando máscara, claro:


*Não tirei fotos dos primeiros procedimentos por motivos de achar que poderia me atrapalhar e o celular ser um vetor de contaminante.
**Não achei onde colocar o pré-fixo "Em andamento"
Até a próxima atualização!
Última edição: