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Completo Cultivo de p. cubensis (pf -> spawn -> bulk) improvisando e experimentando

Diário de cultivo completo.
Boms dias e boas noites Senhoras e Senhores loucomellows! :D :D

Bom, como alguns ja sabem faz algum tempo que venho experimentando com isolamento de p.cubensis em papelao/agar, cultivando bolos(PF ROCKS :) ) e alem disso testando novas técnicas de cultivo.
Como esses dias a cocacao de saco estava grande, resolvi entao abrir esse diario e ir escrevendo pouco a pouco(haja sapiencia!) os procedimentos feitos, pra tentar relatar algo com mais carinho que os ultimos dos meus posts.

Os valores das receitas que estarei postando aqui sao valores aproximados, pois as receitas foram feitas por pura intuição. E muito do cultivo tambem, na verdade estou testando coisas novas, e sempre existe aquele receio de errar e nao conseguir uns cogumelos. Mas como um bom cultivador vc busca pela experienca tb e nao só pelos cogumelos. Eu adoro cultivar assim, INLOCA(e sobre os efeitos de _\|/_ hehe ;) ), é muito mais emocionante, experimentação pura(YES!), cansei de ficar fazendo só bolo PF seguido por receita exata, precisava ser mais ALQUIMISTA na coisa heheh.

Mas serio, ainda q eu esteja fazendo esse cultivo a la experimental, vao surgir algumas duvidas em relacao as novas tecnicas q vou usar, agradeceria muito a ajuda/conselho/critica dos papais(e mamães) cogumeleiros enquanto aos procedimentos a seguir.

Então vamos lá!

Informacoes gerais do cultivo

Strain: ???

Forma de Cultura: Carimbo de Esporos

Idade do carimbo: 1 mes

Fornecedor: 2° geracao de Carimbos proprios(meus filhos :D)

Fornecedor Original da Strain: Um conhecido de suecia, o carimbo da 1° geracao era originalmente de um amigo dele que cultivava cubies a mais de 20 anos, e estabilizou essa strain com isolamento x cruzamentos por 20 anos consecutivos. Nao posso confirmar a historia tanto porque o cultivador já morreu, e consequentemente nao posso saber qual o nome da strain que ele desenvolveu :(. Mas posso confirmar a estabilidade da genetica, e a dominancia de micelio rizomorfico desde uma seringa multi-esporos. Realmente um micelio muito voraz! :)

Técnicas Utilizadas: Seringa, Bolos PF, Bolsas de Spawn, Substrato Bulk, Esterilização e Pasteurização

Ciclo do Cultivo:
Carimbo de Esporos -> Seringa -> Bolo PF -> Bolsas de Spawn -> Terrario Bulk(palha) -> Carimbos de Esporos(espero chegar aqui dnv!)

Fases do Cultivo

1- Confecção de seringas a partir de carimbo de esporos.
2- Confecção e inoculação de Bolos PF.
3- Confecção e inoculação de Bolsas de substrato nitrogenado.
4- Confecção, inoculação e frutificação de Terrario Bulk(palha+spawn).
5- Confecção de Carimbo de Esporos.


1-Confecção de seringas a partir de carimbo de esporos.



Materiais Utilizados:
- Glovebox(Caixa de plastico de 50L com 2 buracos, nao é 100% hermetica)
- Alumínio
- Seringas vazias
- Agua destilada
- Álcool para assepsia.
- Carimbo de esporos
- Luvas
- Roupa limpa(nem sempre eu tenho auheuhauhe).
- Panela de Pressao
- Pote de vidro medio(300 ml aprox.)
- Potinho de vidro minusculo com tampa(50ml aprox)
- Filtro de cafe.
- Lampião de alcool
- Papel de cozinha.

Procedimento:

- Peguei as seringas vazias e limpas, e enrolei elas no alumínio.
- Depois peguei a tampa do pote medio fiz um furinho no meio da tampa, e recortei um pedaço de filtro de cafe na forma da tampa e encaxei por dentro da tampa, pra tapar o furo.
- Então enchi 80% do pote medio de agua destilada e tampei o pote bem apertado com a tampa+filtro de cafe.
- Depois cobri o pote com alumínio(igual um PF). Então peguei o potinho minusculo pus a tampa nele mas SEM APERTAR e enrrolei em alumínio também.
- Então pus tudo na panela de pressão, com um rack de metal pra suporte dos instrumentos, pus de 3 a 4 dedos de agua na panela e esterelizei por 1 hora o mais perto possivel de 15psi(o ponto que começa a escapar vapor pela válvula).
- Depois de desligar a PP, dexei esfriar por 3 horas sendo que na ultima hora limpei a glovebox de ribabaixo com alcool desinfetante e papel de cozinha.
-coloquei o lampião aceso(CUIDADO!), o alcool, carimbo de esporos e papel cozinha dentro da glovebox, tomei banho, escovei dentes, e vesti a roupa limpa e luvas(nao uso mascaras).
- Comecei colocando rapidamente os utensílios esterilizados na glovebox.
- A partir de então todo o procedimento foi feito dentro da glovebox sem abri-la nenhuma vez mas ou o menos possivel até o final para evitar circulação de ar.
- Borrifei álcool nas minhas maos e todos os utensílios embrulhados e nas paredes da glovebox e limpei com papel de cozinha tudo.
- Desembrulhei todos os utensilios do aluminio menos uma das seringas(essa fica pra depois).
- Abri os esporos, tirei a capa de plastico protetora da agulha, esterilizei a agulha no lampião até ficar vermelha, espetei no pote medio pelo furo previamente feito na tampa com filtro e suguei até enxer a seringa de agua destilada
- Com a seringa cheia coloquei de 3, 4 gotinhas na superfície da metade do carimbo e com a agulha esfreguei BEEM SUAVEMENTE pra soltar esporas na agua da superfície. Mas tomei muito cuidado pra nao rasgar o alumínio, é bem delicado esse passo.
- Depois CUIDADOSAMENTE(dalhe suadeira) verti esse liquido dentro do copinho de shoot e jorrei o resto da agua da seringa la dentro. Fechei o potinho bem apertado e chacualhei a mistura, limpei a agulha no papel de cozinha pra tirar a suspensão,depois passei no lampião novamente ate ficar vermelha, rapidamente abri o potinho e suguei a solucao de agua destilada + esporos pra dentro da seringa. Tomei máximo cuidado pra evitar a entrada de ar na seringa, e tampei a agulha com a protecao de plástico.
- Fiz o mesmo procedimento com a outra metade do carimbo(demais pra 1 seringa soh, eu sei :p) e com a seringa restante. Guardei as 2 seringas dentro de um saco ziplock grande com menos ar dentro possivel,e coloquei na geladeira pra repousar enquanto os esporos se hidratavam.

2-Confecção e inoculação de Bolos PF.

Notas: Como foram 17 bolos em total, separei a confeccao em 2 sessoes, ou seja, repeti o seguinte procedimento 2 vezes.

Materiais Utilizados:
- 14 jarros de 320ml aprox., e 3 de 600ml aprox., todos LIMPOS, e com 2 furos nas laterais das tampas.
- Filtro de cafe
- Alumínio
- Alcool
- Luvas
- Papel cozinha
- Glovebox
-Vasilha grande
-Colher de Madeira.

Receita dos bolos
(aprox.)
- Vermiculita 10 partes
- FAI 5 partes
- Agua da torneira 5 partes
- Levadura de cerveja em flocos 1 parte
- Borra de café 0,5 a 1 parte
- Gesso 1 a 1,5 partes

Procedimento:

- Na vasilha grande, misturei com a colher os ingredients nesta ordem:
Vermiculita e Agua + FAI e aditivos até homogenizar a mistura.
- Preenchi 3/4 dos 17 jarros com as maos, esfarelando o substrato pouco a pouco dentro dos potes pra conseguir um meio bem arejado.
- Passei um papel cozinha com alcool nas bordas de todos os potes limpar o substrato suspendido na borda dos copos, evitando assim, contaminacoes.
- Selei até o topo todos os potes com vermiculita seca.
- Recortei filtros de café para as 17 tampas com furos, o tamanho justo pra caber o filtro DENTRO das tampas.
- Fechei todos os potes nao muito apertado com as tampas com filtro de café
- Pus uma dupla folha de aluminio em todos os potes.
- PPzei (nova expressao :eek:) eles por 1 hora a 15psi(ou o mais perto disso … )
- Esperei 4 horas para o resfriamento dos bolos e enquanto isso, repeti os mesmo procedimentos de assepsia da glovebox e de mim tb :p
- Dentro da glovebox, coloquei o lampiao(CUIDADO!!) as seringas no saco ziplock previamente hidratadas por pelomenos 5 dias, alcool, papel de cozinha, e os bolos esterilizados.
- Peguei uma seringa de esporos do saco ziplock, tirei a capa protetora da agulha , limpei a agulha com alcool e papel cozinha, passei no lampiao até ficar vermelha, retirei a capa de aluminio e inoculei o bolo nos 2 pontos, e rapidamente pus o aluminio emcima otravez.
- Repeti o mesmo procedimento com os outros bolos (haja suor e sapiencia), e sempre entre bolo e bolo, eu limpava a agulha com papel cozinha e passava no lampiao até ficar vermelha
- Depois disso os bolos foram diretamente para a incubadora a 26.5-28C°.

Como mostrei no outro topico, esse era o resultado depois de 2 semanas de 16 dos 17 copos.

1 deles joguei for a pois o substrato estava muito denso e apertado, nao ouve colonizacao eficiente.

cakes 2° geracao strain desconhecida.JPG

Nao tirei muitas fotos mas tinha bastante micelio rizomorfico e densos predominando em 70-80% dos copos


3-Confecção e inoculação de Bolsas de substrato nitrogenado.

Materiais Utilizados:
- Glovebox
- 4 Bolsas de PP5 com filtro acoplado
- Alcool
- Barbantes de fibra vegetal
- 16 Bolos 90-100% colonizados

Receita do substrato nitrogenado
(aprox.)

Nota: Fiz suficiente pra enxer as 4 bolsas até a metade.

- Fibra de coco 10 partes
- Esfagno seco 8 partes
- Vermiculita 4 partes
- Borra de Café 1 parte
- Mingau vitaminado pra bebe ½ parte
- Gesso 2,5 partes
- Agua suficiente pra HIDRATAR o substrato(explico agora)


Procedimento:

-Primeiro peguei o esfagno seco e piquei ele com a tesoura, pra facilitar na mistura com o resto do substrato
-Entao hidratei o esfagno com agua suficiente pra que quando voce aperte o esfagno hidratado com a mao caia umas 5, 6 gotinhas no maximo.
-Depois hidratei a fibra de coco submergindo-a em um balde com agua por 40 minutos
-Enquanto isso hidratei tambem a vermiculita com agua, tirei o exesso de agua dela e da fibra de coco.
-Misturei entao a vermiculite umeda + fibra de coco umeda + esfagno umedo + mingau vitaminado + borra de café + gesso até homogenizer a mistura.
-Enxi as 4 bolsas com o substrato, e enrrolei as bolsas de modo que ficasse menos ar dentro delas possivel, tipo um vacuo, entao amarrei a ponta da bolsa com barbante de fibra vegetal.

-Com um rack de metal na panela de pressao coloquei as 4 bolsas bem apertadinhas e coloquei um prato pequeno emcima delas no caso da bolsa inxar nao tapar o buraco de escape da PP.
-Esterilizei as 4 bolsas a 1 hora e 10 minutos a um pouco mais que 15 psi.
-Dexei as bolsas esfriarem dentro da PP por 12 horas.
-Na ultima hora novamente repeti todo o processo de assepsia novamente
-Peguei todos os bolos que estavam 13 deles 100% colonizados, os 3 grandes estavam uns 85%.
-Limpei TODOS os jarros por for a com alcool desinfetante antes de por na glovebox.
-Coloquei rapidamente as bolsas enrroladas seladas dentro da glovebox, e os cakes limpos por fora.
-Dentro da glovebox, limpei tudo com alcool outravez. Tanto os jarros ja sem o aluminio e as bolsas SEM DESENROLAR elas.
-Entao peguei 1 das bolsas desenrrolei ela um pouquinho, desamarrei a corda da ponta, e abri a bolsa.
-Peguei 4 cakes, abri eles, tirei a camada de vermiculita seca, e joguei o bolo direto na bolsa, SEM TOCAR O CAKE.
-Rapidamente re-selei a bolsa com os 4 cakes dentro, e desenrrolei o resto da bolsa, pra que os cakes entrassem em contato com o substrato nitrogenado.
-Entao peguei a bolsa selada e comecei a despedacar os cakes com a mao por for a da bolsa(obviamente),
-Foi bem dificil pois os bolos estavam MUITO densos, o micelio tinha uma resistencia incrivel (bom sinal :D:) )
-Mas literalmente esfarelei os bolos dentro do substrato nitrogenado, para espalhar o micelio o maximo possivel pelo substrato.
-Entao mexi até homogenizar a mistura do substrato nitrogenado + farelo de bolos colonizados.
-Repeti o procedimento com o resto das bolsas e cakes.
-As bolsas foram pra incubar por mais 7 a 10 dias no escuro, para o micelio se recuperar e dominar o novo meio.

Ainda nao tirei muitas fotos, mas até entao parei poraqui. O proximo passo SE todas as bolsas colonizarem legal sem nenhuma infeccao, vai ser a incoulacao das bolsas em palha pasteurizada. É a primeira vez que vou mecher com pasteurizacao e tambem substrato bulk em cultivo INDOOR. Sera q vai? Nao sei, so fazendo pra ver. Enquanto isso estou agora quebrando a cabeca com o terrário. Logo vou falar sobre o terrario que quero fazer, o sistema de troca gasosa e mantimento da umedade. Por enquanto é só.

Valeu a todos!
 
Are you Inn Mate?
Im InMate!
Are You Inn Mate?
Im Inmate!@fokin#chemicalBroda~!
 
Raios cada Cogumelão :eek:

Parabéns mano Insider mui belos:love:
 
Monstro mesmo Insider! vo deixa um salve aí, muito bom ler esse diário , e os frutos nem preciso comentar né?!? Show de bola:)
 
Wow, um wave de likes do meu cultivo denovo hehe, apesar de se rum cultivo do ano passado, valeu a todos novamente hehe :)
 
Esse diário é uma aula. Parabéns Insider!
 
Insider
Mais e ai, lembrou o nome do tiozão para renomear a strain?
 
Passam os anos e teu diario segue vivo irmao!! Parabéns por teu cultivo!!
 
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