Técnica de clonagem/isolamento em papelão
O método permite a clonagem sem o uso de ágar. O papelão é celulose pura, favorável para cubensis e desfavorável para o crescimento dos contaminantes, que buscam nutrientes. Isso não impede que os contaminantes fiquem “escondidos” no papelão, por isso a necessidade de esterilizar. Funciona para muitas espécies, em especial para os que se proliferam melhor em madeira morta. Aqui foi usado P. cubensis.
Corte um quadrado 3cmx3cm de papelão, desses ondulados sem tinta ou muita cola, retire os lados lisos e use somente a parte ondulada. Remova os resíduos de cola.
Dentro de um copo coloque 1/4 de água e o pedaço de papelão. Pode ser usado perlon (polyfill) para fazer um filtro no copo, máscaras descartáveis ou camadas de filtro de café. Leve ao microondas em potência máxima até começar a ferver, então desligue e coloque em uma potencia bem mais baixa só para manter a temperatura até totalizar 5 minutos. Lave-o em água corrente, salpique um pouco de vermiculita e repita o procedimento mais uma vez. Isso vai hidratar o papelão e também diluir a cola em água. Limpe um pote plástico com tampa ou outro recipiente com álcool (aqui foi usado pedra petri), retire o papelão do copo, coloque no recipiente limpo e deixe tampado por enquanto.
Em um local previamente limpo, pegue o cogumelo escolhido. Após um corte transversal remova um pequeno pedaço do centro próximo a base e deixe submerso em uma solução de água oxigenada 3% e água destilada, 1ml/9ml durante alguns segundos e passe rapidamente para o centro do papelão, feche novamente o pote, vedado, e guarde em local escuro em temperatura de incubação. Você pode umedecer o papelão com meio de cultura líquida se quiser.
Faça mais dois ou três isolamentos, até que o micélio resultante seja extremamente rizomórfico. Esse micélio coloniza mais rapidamente, é mais resistente a contaminantes, frutifica mais e de forma estável. Os frutos são agrupamentos de hifas, que originam primórdias e o corpo do cogumelo.
Se a rede de hifas não é robusta poucos frutos são gerados.
Você pode transferir diretamente para CL’s, grãos ou armazenar o micélio em água estéril.
Um detalhe importante é que essa técnica pode ser usada para clonar cogumelos secos há tempos, desde que estes tenham sido bem armazenados e em temperatura abaixo de 35°C.
Corte um quadrado 3cmx3cm de papelão, desses ondulados sem tinta ou muita cola, retire os lados lisos e use somente a parte ondulada. Remova os resíduos de cola.
Dentro de um copo coloque 1/4 de água e o pedaço de papelão. Pode ser usado perlon (polyfill) para fazer um filtro no copo, máscaras descartáveis ou camadas de filtro de café. Leve ao microondas em potência máxima até começar a ferver, então desligue e coloque em uma potencia bem mais baixa só para manter a temperatura até totalizar 5 minutos. Lave-o em água corrente, salpique um pouco de vermiculita e repita o procedimento mais uma vez. Isso vai hidratar o papelão e também diluir a cola em água. Limpe um pote plástico com tampa ou outro recipiente com álcool (aqui foi usado pedra petri), retire o papelão do copo, coloque no recipiente limpo e deixe tampado por enquanto.
Em um local previamente limpo, pegue o cogumelo escolhido. Após um corte transversal remova um pequeno pedaço do centro próximo a base e deixe submerso em uma solução de água oxigenada 3% e água destilada, 1ml/9ml durante alguns segundos e passe rapidamente para o centro do papelão, feche novamente o pote, vedado, e guarde em local escuro em temperatura de incubação. Você pode umedecer o papelão com meio de cultura líquida se quiser.
Faça mais dois ou três isolamentos, até que o micélio resultante seja extremamente rizomórfico. Esse micélio coloniza mais rapidamente, é mais resistente a contaminantes, frutifica mais e de forma estável. Os frutos são agrupamentos de hifas, que originam primórdias e o corpo do cogumelo.
Se a rede de hifas não é robusta poucos frutos são gerados.
Você pode transferir diretamente para CL’s, grãos ou armazenar o micélio em água estéril.
Um detalhe importante é que essa técnica pode ser usada para clonar cogumelos secos há tempos, desde que estes tenham sido bem armazenados e em temperatura abaixo de 35°C.
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