Inoculação
Limpe a panela, externamente, com solução de água sanitária diluída e pano fino. Abra a panela retire o pote, limpe-o com álcool e passe para a glove box.
Retire a primeira tampa de papel alumínio do pote e reserve. Após retirar a seringa com esporos do papel alumínio, passe álcool em toda ela e faça furos no papel alumínio do pote, injetando cerca de 0,5 ml da solução. Em bolos PF, faça quatro furos nas laterais do pote para uma rápida colonização
Cubra os potes com a tampa de papel alumínio retirada e passe fita adesiva em volta. É muito difícil entrar contaminantes pelos furos de inoculação.
Guarde os potes em caixa de isopor a cerca de 25°C (calor de menos retarda o processo, mas em demasia, mata os fungos ). Use um termostato.
Sacudir logo depois de inocular é um erro, nunca faça isso. Se você fizer isso, o micélio será felpudo no início, como algodão fino. Eu sugiro inocular e não sacudir pelo menos por 1 semana. Sacudindo, você espalha os esporos pelo pote forçando o micélio monocariótico buscar por um par. Se você deixar os esporos germinarem próximos uns aos outros, eles se unirão e formarão micélio dicariótico nos primeiros dias, se tornando denso e rizomórfico nos próximos dias.
Somente leve um bolo para o terrário quando ele estiver 100% colonizado.
Caso contrário ele vai contaminar e espalhar a contaminação em todo terrário. Se a colonização paralisar, provavelmente será por falta de O2. Troque, dentro da glove, a tampa de papelalumínio por um papel coador de café.
Utilize somente agulhas de calibre grosso ao trabalhar com CL’s:
Retire a primeira tampa de papel alumínio do pote e reserve. Após retirar a seringa com esporos do papel alumínio, passe álcool em toda ela e faça furos no papel alumínio do pote, injetando cerca de 0,5 ml da solução. Em bolos PF, faça quatro furos nas laterais do pote para uma rápida colonização
Cubra os potes com a tampa de papel alumínio retirada e passe fita adesiva em volta. É muito difícil entrar contaminantes pelos furos de inoculação.
Guarde os potes em caixa de isopor a cerca de 25°C (calor de menos retarda o processo, mas em demasia, mata os fungos ). Use um termostato.
Sacudir logo depois de inocular é um erro, nunca faça isso. Se você fizer isso, o micélio será felpudo no início, como algodão fino. Eu sugiro inocular e não sacudir pelo menos por 1 semana. Sacudindo, você espalha os esporos pelo pote forçando o micélio monocariótico buscar por um par. Se você deixar os esporos germinarem próximos uns aos outros, eles se unirão e formarão micélio dicariótico nos primeiros dias, se tornando denso e rizomórfico nos próximos dias.
Somente leve um bolo para o terrário quando ele estiver 100% colonizado.
Caso contrário ele vai contaminar e espalhar a contaminação em todo terrário. Se a colonização paralisar, provavelmente será por falta de O2. Troque, dentro da glove, a tampa de papelalumínio por um papel coador de café.
Utilize somente agulhas de calibre grosso ao trabalhar com CL’s:
- Próxima página: Incubação
- Previous page: Esterilizando o Substrato
Este artigo apresenta o mesmo tutorial deste outro com a adição de algumas...
