Procedimento Geral
1) Colocar o suporte metálico furado (vem junto com algumas panelas de pressão) no fundo da panela para evitar contato o contato direto do fundo dos vidros com o fundo quente da panela. Colocar uma camada de água fria no fundo da panela de acordo com as instruções do fabricante. A camada de água deve ter em torno de 4,0 a 5,0 cm de altura acima do suporte (cerca de 1,5 litros para uma panela de 7,0 litros e cerca de 3,5 litros para uma panela de 20 litros). O importante é que permaneça sempre uma camada de água no fundo da panela durante todo o processo de esterilização.
![suporte_na_panela.jpg suporte_na_panela.jpg](https://teonanacatl.org/data/attachments/23/23152-e7498ece65b1dd61349255078d8dd175.jpg)
![suporte_no_fundo.jpg suporte_no_fundo.jpg](https://teonanacatl.org/data/attachments/23/23153-cfff33955747de60b95ec27fa582c561.jpg)
![colocando_agua.jpg colocando_agua.jpg](https://teonanacatl.org/data/attachments/23/23154-44f4e82c9d1f7b9148e38dc511444289.jpg)
2) Colocar os frascos com o material que vai ser esterilizado dentro da panela, devidamente apoiados para que não tombem.
![frascos_na_panela.jpg frascos_na_panela.jpg](https://teonanacatl.org/data/attachments/23/23155-8970672eec3c39c75f3b703d8c8264d2.jpg)
3) Fechar a panela de pressão com a tampa, porém não colocar o peso que controla a saída do vapor no pino central da tampa da panela.
4) Acender o fogo e deixar ferver em fogo alto. Quando iniciar a saída de vapor pelo pino central da tampa, marcar cerca de 3 a 5 minutos para que todo o ar existente na panela seja eliminado e o jato de vapor saia de forma contínua. A presença de ar misturado ao vapor d’água dentro da panela faz com que a temperatura de ebulição da água seja menor do que quando se tem somente vapor d’água, prejudicando a eficiência da esterilização.
5) Colocar o peso no pino da tampa da panela, com o auxílio de uma luva grossa de PVC de cano longo para evitar queimaduras com o vapor que está saindo.
![pino_e_luva.JPG pino_e_luva.JPG](https://teonanacatl.org/data/attachments/23/23156-eac87c98a2978e310920e7d549341648.jpg)
6) Quando o vapor recomeçar a sair e começar a agitar o peso, baixar a intensidade da chama para manter-se apenas uma saída de vapor constante porém sem muita agitação interna. Começa aqui a contagem do tempo de esterilização.
7) Quando chegar ao término do tempo de esterilização, apagar o fogo e deixar a panela esfriar até a temperatura ambiente antes de abri-la para retirar os frascos (geralmente devemos abrir a panela só no dia seguinte). Se for aberta quando os frascos estiverem ainda quentes, podem ocorrer quebras por choque térmico.
8) Para o caso do preparo de tubos de ágar inclinado, os tubos devem ser retirados ainda quentes assim que a pressão interna for eliminada totalmente. Deve-se deixar resfriar a panela por mais 15 minutos após a pressão ter-se igualado com a pressão ambiente para se retirar os tubos de ensaio (com o auxílio das luvas de cano longo). Se a temperatura do meio de cultura baixar para menos de 45 ºC, este endurecerá antes que possamos posicionar os tubos para resfriarem inclinados.