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Completo Dancing Tigers (passo-a-passo)

Diário de cultivo completo.
Com seringas prontas posso trabalhar em várias aplicações de microscopia. Observar o processo germinativo dos fungos. Servem também como prática para inoculação de variedades de espécies comestíveis. Escolhi o P. Cubensis por ser um dos o mais resistentes do gênero.


Confecção das seringas com esporos

Na confecção das seringas trabalhei com as mãos dentro de uma glovebox limpa e desinfetada. Uso excessivo de água sanitária no isopor, secagem, muito álcool.
Seringas foram compradas novas, logo, dispensam o processo de esterilização, somente foi passado um guardanapo com álcool na parte externa das embalagens.


A água utilizada para a confecção das seringas, encontrada em qualquer farmácia.

Retirada a tampa da embalagem e posto um esparadrapo, facilitando assim, a retirada de água com a agulha da seringa.


Antes de iniciar a confecção da seringa dentro da "glovebox" observe se todos os materias já se encontram dentro da caixa, evitando assim a sua abertura a todo momento. A partir do momento em que a caixa é esterilizada com álcool e todos os materias que ali entram também estão esterilizados, não se deve mais abrir a caixa.

Recorte e abra a embalagem


Embalagem da agulha


Retirando o copo (onde será feita a mistura água+esporos) dentro de embalagem estéril.


Passando mais um algodão com álcool no copo


Abrindo o carimbo de esporos


Algodão com álcool no carimbo de esporos (parte externa)


Mais um álcool na tesouro de procedimentos


Um belo exemplar!


Recortei o carimbo de esporos no meio, para render mais seringas



Com a colherzinha de procedimentos devidamente esterilizada, raspe suavemente os esporos dentro do copo



Até não sobrar mais nada


Sugue a água com a seringa do vasilhame



Injete no copo


Sugue novamente a água, jogue novamente no copo, fazendo isso, estarás misturando bem a água com os esporos


A mistura ficou bem homogenea



Feche a seringa


O carimbo de esporos foi confeccionado em 2007, já tendo mais de ano, é possível que os esporos possam estar um pouco desidratados. Deixei as seringas 48horas em repouso na geladeira, assepticamente lacradas, para reidratarem.

Preparei quatro seringas de 20ml cada.
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Preparo do substrato

Primeiramente, os copos que serão usados, foram esterilizados por 15min em fogo alto


Feche a tampa para ter melhores resultados


Pano dobrado no fundo da panela, encha os vidros com água.
Deixar secar os copos ao natural, para evitar fiapos de algodão.
Não apoiar os copos em superfície fria, vai trincar.

Vermiculita (média) + Água mineral + Farinha de Arroz Integral (moída no liquidificar para despedaçar-se) + copo, bacia de porcelana e luvas para procedimento.


Coloca-se 02 copos de vermiculita na bacia e acrescenta-se 01 copo de água



Misture



Só então acrescentei 01 copo de FAI, percebi que assim, nessa ordem: vermiculita+água e depois FAI, o composto fica mais aerado.



Pegando na mão, dessa forma, você percebe que o composto está no ponto.



Um zoom no composto


Um substrato encharcado é dificil de colonizar e propício a contaminações.

Passe um pano com álcool nos copos


Com uma colher, coloque o composto dentro do copo limpo



Deixe um espaço, é onde será acrescentada a vermiculita






Acrescente a vermiculita



Ainda assim, deixe um pequeno espaço livre em cima do copo


Amasse, bem de leve, a vermiculita nas bordas e no meio, firmando assim o composto.


Percebe-se na foto, que alguns fragmentos do composto ficam grudados na borda do copo.
Um guardanapo com álcool e limpe vigorosamente essas bordas





Faça em todos os copos



Passe um álcool em todos os recortes do papel alumínio


Feche bem com papel alumínio os copos que irão para a panela de pressão


Fiz 02 furos em cada copo, e coloquei + uma camada de folha de papel alumínio por cima


Na panela de pressão, observe bem a integridade da panela, pino de emergência (vermelho), borracha de lacre.

Coloque um pano de copo no fundo, evitando assim o contato dos copos direto com o fundo da panela, e que estes batam muito um no outro, podendo eventualmente rachar.
Coloquei água fervida e previamente resfriada, foi 1Litro


1Litro foi o suficiente de água para a panela de pressão trabalhar:
- 10 minutos em fogo alto
- 60 minutos em fogo baixo
- 30 minutos (finais) em fogo alto

Minha panela é de 7,5 litros, 1 Litro de água foi o suficiente para não faltar água e queimar o pano ou acontecer algum acidente.

A panela ficou em repouso por 12 horas, esfriando.

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Inoculação

Quanto a retirada dos copos de dentro da panela de pressão para irem dentro da "glovebox". Utilizei-me de touca cirúrgica, luvas e máscara, o quarto fechado para não haver circulação de ar. Um ambiente estéril.
Álcool na panela antes de abrir e nas mãos com luvas.

Retirando a primeira camada do papel, já dentro da glovebox.


Abrindo o invólucro das seringas que estavam na geladeira



Passe um álcool





Mergulho a seringa em um copo com álcool antes de cada inoculação, dou uma batidinha na seringa com os dedos para o álcool cair.


Esprema a seringa devagar, fiz 02 furos equidistantes em cada copo, 2,5ml em cada furo, 05ml por copo


Feita a inoculação, coloque uma camada de papel alumínio por sobre o copo e feche-o, não esquecendo de passar um álcool na folha antes de agregá-la ao copo






Muito importante se retirar as rebarbas de papel alumínio




Com os copos fora da glovebox, faça a vedação com fita



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MONTANDO A "GLOVEBOX" (passo-a-passo)
https://teonanacatl.org/threads/mexican-palenque.3704/
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DT001.jpgDT002.jpgDT003.jpgDT004.jpgDT005.jpgDT006.jpgDT007.jpgDT008.jpgDT009.jpgDT010.jpgDT011.jpgDT012.jpgDT013.jpgDT014.jpgDT015.jpgDT016.jpgDT018.jpgDT019.jpgDT020.jpgDT021.jpgSUBSTRATO 001.jpgSUBSTRATO 002.jpgSUBSTRATO 003.jpgSUBSTRATO 004.jpgSUBSTRATO 005.jpgSUBSTRATO 006.jpgSUBSTRATO 007.jpgSUBSTRATO 008.jpgSUBSTRATO 009.jpgSUBSTRATO 010.jpgSUBSTRATO 011.jpgSUBSTRATO 012.jpgSUBSTRATO 013.jpgSUBSTRATO 014.jpgSUBSTRATO 015.jpgSUBSTRATO 016.jpgSUBSTRATO 017.jpgSUBSTRATO 018.jpgSUBSTRATO 019.jpgSUBSTRATO 020.jpgSUBSTRATO 021.jpgSUBSTRATO 022_Pula.jpgSUBSTRATO 023.jpginoculacao 001.jpginoculacao 002.jpginoculacao 003.jpginoculacao 004.jpginoculacao 005.jpginoculacao 006.jpginoculacao 007.jpginoculacao 008.jpginoculacao 009.jpginoculacao 010.jpginoculacao 011.jpginoculacao 012.jpginoculacao 013.jpg
 
Última edição:
esterilizá-las novamente em água fervente
acredito que a água fervente não garanta a esterilização, ainda mais se pedaços de substrato. mesmo q minúsculos, tenham se aderido à ela.

O mais aconselhável é ter uma seringa de vidro - esterelizável em PP - e ir trocando as agulhas mesmo ...

(ou usar inoculação direta carimbo-trigo)
 
acredito que a água fervente não garanta a esterilização, ainda mais se pedaços de substrato. mesmo q minúsculos, tenham se aderido à ela.

O mais aconselhável é ter uma seringa de vidro - esterelizável em PP - e ir trocando as agulhas mesmo ...

(ou usar inoculação direta carimbo-trigo)
além disso milhoes de esporos se aderem ao embolo da seringa(que é microporosa do ponto de vista de um esporo) podendo ocorrer contaminaçao cruzada entre outras especies de fungo.
 
Ótimo seu diário.

Um excelentre incentivo aos que, como eu, estão iniciando-se no cultivo.
Obrigdo

Abrços irradiantes
 
Ótimo seu diário.

Um excelentre incentivo aos que, como eu, estão iniciando-se no cultivo.
Obrigdo

Abrços irradiantes

Obrigado Martini, você me deu uma sede inesperada.

Atualizando... a novela mexicana continua.
Foto de 30.08.09
dancing tiger 01.JPG
 
Em 07.09.09

orissa_3.JPG
 
Última edição por um moderador:
Que bom ter causado essa reação!
Os cultivos relatados com fotos são muito mais fáceis de entender e assim
fica melhor para assimilar as técnicas.


Boa sorte!

Abraços irradiantes.
 
EEEEEEEEEEEEIIIIIIIIIIIIIIIIITA!!!

E tome fruto.

Paz
 
Parabens!Ó-T-I-M-O diário! Muito bem explicado,com fotos,e lindos DT! Muito bom mesmo.

Paz e luz!
 
cara... simplesmente você fez um tópico que com certeza vai para os favoritos... valeu mesmo pelo tópico muuuuuuuuito bem explicado... tópicos assim que tiram a dúvida de qualquer um...
 
Putz... vc jah recebeu tantos elogios por esse tópico... que acho que nem precisava...

Mas... um elogio sempre nos incentiva a continuar melhorando... entao cara...

Agradeço de verdade pelo belo trabalho... eu como iniciante... (primeiro cultivo em breve... ainda estou em faze de pesquisa)... aprendei muito com seu topico.

Obrigado...

Good Vibes!
P.L.U.R.
 
poxa tup no meu micro as unicas fotos q ñ falhão, (x) são seus topicos bem detalhados adoro sua dedicação....:)
 
Tupy, muito bom, estou com um carimbo de dancing tiger aqui:p

e agora já tenho também um manual prático de como cultivar a raça.....
 
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