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Completo Dancing Tigers (passo-a-passo)

Diário de cultivo completo.
Com seringas prontas posso trabalhar em várias aplicações de microscopia. Observar o processo germinativo dos fungos. Servem também como prática para inoculação de variedades de espécies comestíveis. Escolhi o P. Cubensis por ser um dos o mais resistentes do gênero.


Confecção das seringas com esporos

Na confecção das seringas trabalhei com as mãos dentro de uma glovebox limpa e desinfetada. Uso excessivo de água sanitária no isopor, secagem, muito álcool.
Seringas foram compradas novas, logo, dispensam o processo de esterilização, somente foi passado um guardanapo com álcool na parte externa das embalagens.


A água utilizada para a confecção das seringas, encontrada em qualquer farmácia.

Retirada a tampa da embalagem e posto um esparadrapo, facilitando assim, a retirada de água com a agulha da seringa.


Antes de iniciar a confecção da seringa dentro da "glovebox" observe se todos os materias já se encontram dentro da caixa, evitando assim a sua abertura a todo momento. A partir do momento em que a caixa é esterilizada com álcool e todos os materias que ali entram também estão esterilizados, não se deve mais abrir a caixa.

Recorte e abra a embalagem


Embalagem da agulha


Retirando o copo (onde será feita a mistura água+esporos) dentro de embalagem estéril.


Passando mais um algodão com álcool no copo


Abrindo o carimbo de esporos


Algodão com álcool no carimbo de esporos (parte externa)


Mais um álcool na tesouro de procedimentos


Um belo exemplar!


Recortei o carimbo de esporos no meio, para render mais seringas



Com a colherzinha de procedimentos devidamente esterilizada, raspe suavemente os esporos dentro do copo



Até não sobrar mais nada


Sugue a água com a seringa do vasilhame



Injete no copo


Sugue novamente a água, jogue novamente no copo, fazendo isso, estarás misturando bem a água com os esporos


A mistura ficou bem homogenea



Feche a seringa


O carimbo de esporos foi confeccionado em 2007, já tendo mais de ano, é possível que os esporos possam estar um pouco desidratados. Deixei as seringas 48horas em repouso na geladeira, assepticamente lacradas, para reidratarem.

Preparei quatro seringas de 20ml cada.
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Preparo do substrato

Primeiramente, os copos que serão usados, foram esterilizados por 15min em fogo alto


Feche a tampa para ter melhores resultados


Pano dobrado no fundo da panela, encha os vidros com água.
Deixar secar os copos ao natural, para evitar fiapos de algodão.
Não apoiar os copos em superfície fria, vai trincar.

Vermiculita (média) + Água mineral + Farinha de Arroz Integral (moída no liquidificar para despedaçar-se) + copo, bacia de porcelana e luvas para procedimento.


Coloca-se 02 copos de vermiculita na bacia e acrescenta-se 01 copo de água



Misture



Só então acrescentei 01 copo de FAI, percebi que assim, nessa ordem: vermiculita+água e depois FAI, o composto fica mais aerado.



Pegando na mão, dessa forma, você percebe que o composto está no ponto.



Um zoom no composto


Um substrato encharcado é dificil de colonizar e propício a contaminações.

Passe um pano com álcool nos copos


Com uma colher, coloque o composto dentro do copo limpo



Deixe um espaço, é onde será acrescentada a vermiculita






Acrescente a vermiculita



Ainda assim, deixe um pequeno espaço livre em cima do copo


Amasse, bem de leve, a vermiculita nas bordas e no meio, firmando assim o composto.


Percebe-se na foto, que alguns fragmentos do composto ficam grudados na borda do copo.
Um guardanapo com álcool e limpe vigorosamente essas bordas





Faça em todos os copos



Passe um álcool em todos os recortes do papel alumínio


Feche bem com papel alumínio os copos que irão para a panela de pressão


Fiz 02 furos em cada copo, e coloquei + uma camada de folha de papel alumínio por cima


Na panela de pressão, observe bem a integridade da panela, pino de emergência (vermelho), borracha de lacre.

Coloque um pano de copo no fundo, evitando assim o contato dos copos direto com o fundo da panela, e que estes batam muito um no outro, podendo eventualmente rachar.
Coloquei água fervida e previamente resfriada, foi 1Litro


1Litro foi o suficiente de água para a panela de pressão trabalhar:
- 10 minutos em fogo alto
- 60 minutos em fogo baixo
- 30 minutos (finais) em fogo alto

Minha panela é de 7,5 litros, 1 Litro de água foi o suficiente para não faltar água e queimar o pano ou acontecer algum acidente.

A panela ficou em repouso por 12 horas, esfriando.

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Inoculação

Quanto a retirada dos copos de dentro da panela de pressão para irem dentro da "glovebox". Utilizei-me de touca cirúrgica, luvas e máscara, o quarto fechado para não haver circulação de ar. Um ambiente estéril.
Álcool na panela antes de abrir e nas mãos com luvas.

Retirando a primeira camada do papel, já dentro da glovebox.


Abrindo o invólucro das seringas que estavam na geladeira



Passe um álcool





Mergulho a seringa em um copo com álcool antes de cada inoculação, dou uma batidinha na seringa com os dedos para o álcool cair.


Esprema a seringa devagar, fiz 02 furos equidistantes em cada copo, 2,5ml em cada furo, 05ml por copo


Feita a inoculação, coloque uma camada de papel alumínio por sobre o copo e feche-o, não esquecendo de passar um álcool na folha antes de agregá-la ao copo






Muito importante se retirar as rebarbas de papel alumínio




Com os copos fora da glovebox, faça a vedação com fita



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MONTANDO A "GLOVEBOX" (passo-a-passo)
https://teonanacatl.org/threads/mexican-palenque.3704/
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DT001.jpgDT002.jpgDT003.jpgDT004.jpgDT005.jpgDT006.jpgDT007.jpgDT008.jpgDT009.jpgDT010.jpgDT011.jpgDT012.jpgDT013.jpgDT014.jpgDT015.jpgDT016.jpgDT018.jpgDT019.jpgDT020.jpgDT021.jpgSUBSTRATO 001.jpgSUBSTRATO 002.jpgSUBSTRATO 003.jpgSUBSTRATO 004.jpgSUBSTRATO 005.jpgSUBSTRATO 006.jpgSUBSTRATO 007.jpgSUBSTRATO 008.jpgSUBSTRATO 009.jpgSUBSTRATO 010.jpgSUBSTRATO 011.jpgSUBSTRATO 012.jpgSUBSTRATO 013.jpgSUBSTRATO 014.jpgSUBSTRATO 015.jpgSUBSTRATO 016.jpgSUBSTRATO 017.jpgSUBSTRATO 018.jpgSUBSTRATO 019.jpgSUBSTRATO 020.jpgSUBSTRATO 021.jpgSUBSTRATO 022_Pula.jpgSUBSTRATO 023.jpginoculacao 001.jpginoculacao 002.jpginoculacao 003.jpginoculacao 004.jpginoculacao 005.jpginoculacao 006.jpginoculacao 007.jpginoculacao 008.jpginoculacao 009.jpginoculacao 010.jpginoculacao 011.jpginoculacao 012.jpginoculacao 013.jpg
 
Última edição:
Cara, certamente tem algo peculiar na agua da rede aqui na cidade, pelo menos aqui na velha a agua faz mta espuma e nao fica totalmente transparente no copo, ja senti até um forte cheiro de creolina. Das minhas tentativas de cultivo só consegui exito com agua mineral e com agua da chuva fervida.
Ah, velho passei por um pasto esse finds ali perto de ilhota, vc nao acredita tinha uns gigantescos, uma pena que nao pude colhe-los.

Um abraço e boa sorte no seu cultivo.
 
Dancing Tiger é uma ótima strain... a melhor que já cultivei.

A trip é harmoniosa, filosófica, questionadora e muito positiva!

Tente quantas vezes for preciso, não desista deles!

Desejo good vibes a ti e a teu cultivo :pos:

Ontem inoculei alguns copos com DT tbm... voltei a cultivar :)

Boa Sorte a Todos Nós!

Bem vindo de volta oh sumido! :pos:

Cara, certamente tem algo peculiar na agua da rede aqui na cidade, pelo menos aqui na velha a agua faz mta espuma e nao fica totalmente transparente no copo, ja senti até um forte cheiro de creolina. Das minhas tentativas de cultivo só consegui exito com agua mineral e com agua da chuva fervida.
Ah, velho passei por um pasto esse finds ali perto de ilhota, vc nao acredita tinha uns gigantescos, uma pena que nao pude colhe-los.

Um abraço e boa sorte no seu cultivo.

Obrigado!

Não tenho coragem mais de tomar a água da rede aqui da cidade não!
Já comecei uma captação de água da chuva.

Não colheu os mágicos porque? A cerca de arame era muito bem feita é?!
 
Última edição por um moderador:
bom é usar água de copinho. depois faz um vaso com ele pra não jogar fora.
um amigo teve problemas com a idade dos esporos também. Carimbo com mais de dois anos quase, o cultivo dele não germinou. nem contaminou.

boa vibrações;
 
bom é usar água de copinho. depois faz um vaso com ele pra não jogar fora.
um amigo teve problemas com a idade dos esporos também. Carimbo com mais de dois anos quase, o cultivo dele não germinou. nem contaminou.

boa vibrações;

valeu obrigado :pos:
 
aliás, muito bem relatado seu cultivo, belas fotos... agora q me toquei que não coloquei isso no primeiro post, parabéns. obrigado por compartilhar algo assim :D
 
Novo substrato, nova inoculação.
PE6.
Água mineral.




Agora vai!!!!!! :cool:
PE6.jpg
 
Última edição:
tupy troca esse dissipador de calor por uma PET vedada bixo
isso mela tudo a vedaçao, zoa o aluminio etc...
no mais tudo lindo!
 
tupy troca esse dissipador de calor por uma PET vedada bixo
isso mela tudo a vedaçao, zoa o aluminio etc...
no mais tudo lindo!

Fiz isso :pos:

Ademais, o termostato tá no osso!
Está tão frio aqui no sul do Brasil que temperatura não passa
de 26º dentro da incubadora.
 
Dei uma espiada domingo (14/06)
O micélio ja se apresenta timidamente.
Tá muito frio por aqui, dois casacos é pouco.
 
Parabéns pelos relatos!
Ótimas fotos!

Vai dar tudo certo! Agora
que eles ja deram as caras,
é só aguardar! :D:pos:
 
UOW!!!MUiiito bem detalhado, explicado e fotografado!!! :pos:

Mais e ae, nem sinal do micélio?
 
Depois atualiza pra nós, Tupy!

To torcendo pra dar certo! :pos:
 
Depois atualiza pra nós, Tupy!

To torcendo pra dar certo! :pos:

Valeu pela força Mangue!:pos:

Então... De todos esses copos aqui:
....
DANCINGtigers.JPG

Só consegui salvar 01 (um).
O restante todo contaminou com aquele fungo bem similar ao micélio, branquinho e tal (esqueci o nome agora, desculpem).

O copo saudável é este, a situação é que, ele está a 03 meses, nesse estado "dormente'.
Logo irá em forma de bolo para o terrário, para tentar salvar algo da strain.

Valeu.
incubacao04.JPG
 
Última edição por um moderador:
De todos copos que contaminaram, salvei somente um.

Fiz um casing dele...
Ficará incubando em 30ºC aprox. por 5 dias e depois terrário.
Camada de casing: vermiculita/pó de fibra de coco: 60/40

dancingtiger1.JPGdancingtiger2.JPGdancingtiger3.JPGdancingtiger4.JPGdancingtiger5.JPG

Acredito que o micélio esteja bem bem bem fraco.

Todos os procedimentos foram feitos dentro de glovebox.

Obrigado e até mais.
 
Só consegui salvar 01 (um).
O restante todo contaminou com aquele fungo bem similar ao micélio, branquinho e tal (esqueci o nome agora, desculpem).

Parabéns pelo salvo, tente clonar ele,
assim não sai tanto no preju....

Não dá para salvar bolos com cobweb
se colocar H2O2 neles?
Eu já vi procedimentos aqui uma vez...

O que fez com os contaminados?

Abraço!
Continue forte aí!
 
Parabéns pelo salvo, tente clonar ele,
assim não sai tanto no preju....

Não dá para salvar bolos com cobweb
se colocar H2O2 neles?
Eu já vi procedimentos aqui uma vez...

O que fez com os contaminados?

Abraço!
Continue forte aí!

Existe alguns procedimentos com H2O2 ou água sanitária, mas são procedimentos que não te dão garantias, são só tentativas de salvar um bolo do contaminante.

Bolos contaminados você descarta, enterra.
 
PO cara muito legal teu diário! Logo logo estarei postando aqui o meu tb!

Aquela água purificada lá, o que dizia no rótulo? Derrepente tinha algum tipo de desinfetante dentro que estava atrasando o surgimento do micélio... Usa água destilada q não tem erro e se for usar a mineral, ferve ela por 20 min.

Nas tuas fotos não vi vc "flambando" a agulha, derrepente foi por isso que vc teve um alto indice de contaminação. Passe ela no fogo cada vez q vc for inocular um copo diferente.

Um abraço e boa sorte!

+++Positive Vibrations+++
 
Nas tuas fotos não vi vc "flambando" a agulha, derrepente foi por isso que vc teve um alto indice de contaminação. Passe ela no fogo cada vez q vc for inocular um copo diferente.

Obrigado Beto :pos:
Então, não flambei as agulhas, motivo pelo qual são novas "estéreis" de farmácia mesmo.

E caso eu re-utilize elas, não costumo flambar e sim esterilizá-las novamente em água fervente.

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dia 20/08 coloquei o bolo (sobrevivente) em casing no terrário, condições adversas de temperatura ambiente.
O casing já apresenta nós hifais em toda a superfície, maravilha :)
 
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