É o processo que promove completa eliminação ou destruição de todas as formas de organismos presentes em um Substrato ou local. Isso inclui vírus, Bactérias, Fungos, protozoários, Esporos e organismos pluricelulares. Um meio de cultura ou objeto Estéril e isolado não desenvolve nenhuma forma de vida até ter contato com o meio ambiente ou algum organismo ser introduzido.

Existem diversas técnicas de esterilização de materiais, como Autoclave, chama, forno, produtos químicos bactericidas ou bacteriostáticos, radiação UV, ultrafiltração, etc.

Em cultivos não profissionais de Fungos é muito frequente a Esterilização com uso da panela de pressão.