- 04/07/2019
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Essa é uma tradução feita a partir do tutorial do usuário SpitballJedi no Shroomery.
Link: My SAB (Still Air Box) - Mushroom Cultivation - Shroomery Message Board
Encontrou algum erro? Favor informar para correção.
Por que uma SAB?
Uma das partes mais importantes do cultivo é a limpeza do ambiente de trabalho. Assim que você esterilizar coisas como agar, bolos de PF Tek, grãos, entre outros, eles devem permanecer estéreis até que estejam 100% colonizados pelo nosso fungo.
Mas, como você pode inocular sem contaminar o conteúdo estéril de dentro dos recipientes?
Existem duas correntes sobre como fazer isso: 1) fazer suas tampas com porta de injeção auto-curáveis(self-healing injector port) ou 2) criar um ambiente estéril em que você possa abrir o recipiente sem contaminá-lo.
Eu estou na segunda categoria, criar um ambiente estéril.
A maioria das pessoas usa uma SAB porque elas são baratas e fáceis de fazer. Câmaras de Fluxo Laminar são boas, mas também são caras e precisam de mais conhecimento pra fazer.
Estou aqui para descrever minha SAB
A coisa mais importante sobre uma SAB é o ar parado. Se o ar está parado, ele não consegue jogar contaminantes dentro do seu ambiente de trabalho.
Ter luvas acopladas, como numa glove-box, significa que você não pode esterilizar sua seringa ou lamina no fogo fora da caixa. Outro problema é que o movimento das luvas cria um forte vácuo que faz com que ar contaminado entre. Vista as luvas em vez disso.
Uma SAB não precisa ser estéril, apenas limpa e parada.
Esta é a minha SAB (Still Air Box)
Eu fiz ela com uma caixa plástica de 100L do Wal-Mart. Bastante espaço para trabalhar.
O processo é simples:
Não fique apegado em medidas exatas. Você deve ir conforme a sua própria intuição. Toda SAB vai ser ligeiramente diferente baseada no seu tamanho.
Posicione a caixa na posição que você irá usá-la. No meu caso, eu coloco ela na minha mesa e sento na cadeira, é nessa posição que eu vou trabalhar.
Então eu marco dois pontos na caixa, onde vão ser os buracos dos braços. Eu marco esses pontos na distância dos ombros, isso garante uma posição confortável para trabalhar.
Eu faço os buracos com uma serra-copo de 5 polegadas. (Uma lata de Nescafé aquecida no fogão também serve). Você pode apoiar a caixa num pedaço de madeira pra evitar que o plastico rache.
Notou que a tampa está faltando? Isso é porque eu coloco a caixa de cabeça pra baixo numa toalha. Quando eu borrifo a parte de dentro, a toalha fica molhada e aprisiona os contaminantes. A toalha também serve pra evitar que a caixa escorregue na mesa.
Pronto para começar os trabalhos
Começo estendendo a toalha na minha mesa. Eu tenho toalhas de banho bem grandes, então eu dobro uma vez. Então, eu borrifo a toalha com água e sabão. Qualquer sabão serve, só umas gotinhas por litro de água. O sabão impede a água de evaporar muito rápido e dá um pouco de viscosidade. Eu não vejo a necessidade de limpar a mesa, já que vamos colocar uma toalha encima dela, mas se isso faz você se sentir melhor, vá em frente.
Então, eu limpo as paredes da caixa com álcool 70°. Depois disso, borrifo as paredes da caixa com água e sabão e coloco-a de cabeça pra baixo na toalha. Contaminantes ficam grudados em superfícies úmidas. Eu considero que água com sabão é a melhor opção, já que água sanitária me causa irritação, e álcool evapora muito rápido e é inflamável.
Você pode colocar as coisas que vai utilizar (copos, seringas, etc.) sobre a toalha e depois cobrir com a caixa ou também pode colocar as coisas através dos buracos dos braços, não importa.
Assim que estiver tudo posicionado dentro da caixa, eu fecho os buracos dos braços com plástico filme e deixo ela parada por pelo menos 5min. Depois disso, eu limpo meus recipientes dentro da caixa com álcool 70° e faço a inoculação normalmente.
Dicas
Como já mencionado, o objetivo da SAB é ser um ambiente de ar parado para fazer trabalho estéril. Nós chamamos de trabalho estéril porque você quer manter seu substrato estéril. O interior da SAB não é estéril, só parado. Eu coloco a SAB no comodo com menos circulação de ar, fecho a porta e desligo qualquer coisa que possa criar circulação.
Deixe a caixa repousar antes de limpar seus recipientes dentro.
Eu uso luvas nitrílicas e mangotes de plástico, mas você pode apenas usar uma camiseta de mangas compridas limpa e luvas comuns, desde que bem limpas com álcool. .
Faça toda esterilização no fogo FORA da caixa. O calor da chama pode criar corrente de ar e fazer com que contaminantes acabem entrando.
De fato, acoplar luvas na sua SAB faz com que ela vire uma glove-box. Acoplar luvas faz com que mais ar se movimente dentro da caixa, então por definição, não seria mais uma SAB. Eu tenho certeza que existem diversas formas de evitar que entre ar contaminado na sua glove-box, mas é melhor ter certeza que o interior esteja esterilizado ou será um esforço perdido. Boa sorte se for tentar.
Trabalhe calmamente. Não se apresse, nem seja uma lesma. Faça todos seus movimentos com calma. Se você se apressar pode acabar movimentando demais o ar. Se você for muito lento pode aumentar o risco de contaminação.
Se precisar abrir a tampa dos recipientes, abra antes de colocar dentro da SAB, uma tampa emperrada pode ser um problema dentro da caixa. O que eu quero dizer é que você deve abrir os recipientes o suficiente pra que você não tenha que lutar contra uma tampa dentro da caixa.
Você não tem que lavar as paredes da caixa, algumas borrifadas são mais que suficiente. Umidade demais, principalmente na parte da frente, pode prejudicar a visualização do interior da caixa. É comum a formação de condensação dentro da caixa.
Treine algumas vezes sem nenhum substrato, tentando se acostumar com a limitação dos movimentos dentro da caixa. Você pode aperfeiçoar suas técnicas fazendo transferências para agar ou para grãos, observando se ocorrem contaminações. Eu fiz essa técnica porque estava cansado de comprar esporos e gastar um monte de tempo.
Uma ultima coisa: SEMPRE ESTERILIZE NO FOGO FORA DA CAIXA
(NOTA DO TRADUTOR: eu acendo uma vela num pratinho ao lado da caixa pra esterilizar. Você vai acabar precisando tirar a seringa ou lamina de dentro da caixa para esterilizar na chama, faça isso com calma pra não criar corrente de ar pra dentro da caixa.)
*O texto possui algumas alterações para facilitar o entendimento*
Link: My SAB (Still Air Box) - Mushroom Cultivation - Shroomery Message Board
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Por que uma SAB?
Uma das partes mais importantes do cultivo é a limpeza do ambiente de trabalho. Assim que você esterilizar coisas como agar, bolos de PF Tek, grãos, entre outros, eles devem permanecer estéreis até que estejam 100% colonizados pelo nosso fungo.
Mas, como você pode inocular sem contaminar o conteúdo estéril de dentro dos recipientes?
Existem duas correntes sobre como fazer isso: 1) fazer suas tampas com porta de injeção auto-curáveis(self-healing injector port) ou 2) criar um ambiente estéril em que você possa abrir o recipiente sem contaminá-lo.
Eu estou na segunda categoria, criar um ambiente estéril.
A maioria das pessoas usa uma SAB porque elas são baratas e fáceis de fazer. Câmaras de Fluxo Laminar são boas, mas também são caras e precisam de mais conhecimento pra fazer.
Estou aqui para descrever minha SAB
A coisa mais importante sobre uma SAB é o ar parado. Se o ar está parado, ele não consegue jogar contaminantes dentro do seu ambiente de trabalho.
Ter luvas acopladas, como numa glove-box, significa que você não pode esterilizar sua seringa ou lamina no fogo fora da caixa. Outro problema é que o movimento das luvas cria um forte vácuo que faz com que ar contaminado entre. Vista as luvas em vez disso.
Uma SAB não precisa ser estéril, apenas limpa e parada.
Esta é a minha SAB (Still Air Box)
Eu fiz ela com uma caixa plástica de 100L do Wal-Mart. Bastante espaço para trabalhar.
O processo é simples:
Não fique apegado em medidas exatas. Você deve ir conforme a sua própria intuição. Toda SAB vai ser ligeiramente diferente baseada no seu tamanho.
Posicione a caixa na posição que você irá usá-la. No meu caso, eu coloco ela na minha mesa e sento na cadeira, é nessa posição que eu vou trabalhar.
Então eu marco dois pontos na caixa, onde vão ser os buracos dos braços. Eu marco esses pontos na distância dos ombros, isso garante uma posição confortável para trabalhar.
Eu faço os buracos com uma serra-copo de 5 polegadas. (Uma lata de Nescafé aquecida no fogão também serve). Você pode apoiar a caixa num pedaço de madeira pra evitar que o plastico rache.
Notou que a tampa está faltando? Isso é porque eu coloco a caixa de cabeça pra baixo numa toalha. Quando eu borrifo a parte de dentro, a toalha fica molhada e aprisiona os contaminantes. A toalha também serve pra evitar que a caixa escorregue na mesa.
Pronto para começar os trabalhos
Começo estendendo a toalha na minha mesa. Eu tenho toalhas de banho bem grandes, então eu dobro uma vez. Então, eu borrifo a toalha com água e sabão. Qualquer sabão serve, só umas gotinhas por litro de água. O sabão impede a água de evaporar muito rápido e dá um pouco de viscosidade. Eu não vejo a necessidade de limpar a mesa, já que vamos colocar uma toalha encima dela, mas se isso faz você se sentir melhor, vá em frente.
Então, eu limpo as paredes da caixa com álcool 70°. Depois disso, borrifo as paredes da caixa com água e sabão e coloco-a de cabeça pra baixo na toalha. Contaminantes ficam grudados em superfícies úmidas. Eu considero que água com sabão é a melhor opção, já que água sanitária me causa irritação, e álcool evapora muito rápido e é inflamável.
Você pode colocar as coisas que vai utilizar (copos, seringas, etc.) sobre a toalha e depois cobrir com a caixa ou também pode colocar as coisas através dos buracos dos braços, não importa.
Assim que estiver tudo posicionado dentro da caixa, eu fecho os buracos dos braços com plástico filme e deixo ela parada por pelo menos 5min. Depois disso, eu limpo meus recipientes dentro da caixa com álcool 70° e faço a inoculação normalmente.
Dicas
Como já mencionado, o objetivo da SAB é ser um ambiente de ar parado para fazer trabalho estéril. Nós chamamos de trabalho estéril porque você quer manter seu substrato estéril. O interior da SAB não é estéril, só parado. Eu coloco a SAB no comodo com menos circulação de ar, fecho a porta e desligo qualquer coisa que possa criar circulação.
Deixe a caixa repousar antes de limpar seus recipientes dentro.
Eu uso luvas nitrílicas e mangotes de plástico, mas você pode apenas usar uma camiseta de mangas compridas limpa e luvas comuns, desde que bem limpas com álcool. .
Faça toda esterilização no fogo FORA da caixa. O calor da chama pode criar corrente de ar e fazer com que contaminantes acabem entrando.
De fato, acoplar luvas na sua SAB faz com que ela vire uma glove-box. Acoplar luvas faz com que mais ar se movimente dentro da caixa, então por definição, não seria mais uma SAB. Eu tenho certeza que existem diversas formas de evitar que entre ar contaminado na sua glove-box, mas é melhor ter certeza que o interior esteja esterilizado ou será um esforço perdido. Boa sorte se for tentar.
Trabalhe calmamente. Não se apresse, nem seja uma lesma. Faça todos seus movimentos com calma. Se você se apressar pode acabar movimentando demais o ar. Se você for muito lento pode aumentar o risco de contaminação.
Se precisar abrir a tampa dos recipientes, abra antes de colocar dentro da SAB, uma tampa emperrada pode ser um problema dentro da caixa. O que eu quero dizer é que você deve abrir os recipientes o suficiente pra que você não tenha que lutar contra uma tampa dentro da caixa.
Você não tem que lavar as paredes da caixa, algumas borrifadas são mais que suficiente. Umidade demais, principalmente na parte da frente, pode prejudicar a visualização do interior da caixa. É comum a formação de condensação dentro da caixa.
Treine algumas vezes sem nenhum substrato, tentando se acostumar com a limitação dos movimentos dentro da caixa. Você pode aperfeiçoar suas técnicas fazendo transferências para agar ou para grãos, observando se ocorrem contaminações. Eu fiz essa técnica porque estava cansado de comprar esporos e gastar um monte de tempo.
Uma ultima coisa: SEMPRE ESTERILIZE NO FOGO FORA DA CAIXA
(NOTA DO TRADUTOR: eu acendo uma vela num pratinho ao lado da caixa pra esterilizar. Você vai acabar precisando tirar a seringa ou lamina de dentro da caixa para esterilizar na chama, faça isso com calma pra não criar corrente de ar pra dentro da caixa.)
*O texto possui algumas alterações para facilitar o entendimento*
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