Isolamento: Strain PESA

[Mantus]

Pessoal, boa noite!

Estou começando a trabalhar com isolamento, e no começo é bem comum contaminações até pegar a mão, depois de algumas placas com tricho, agora algumas placas sadias.

Estou usando um PDA laboratorial da Merck, parece ser muito bom. Fiz algumas placas petris e nelas depositei esporos nao muito velhos, algo em torno de 6 meses. Em duas placas os esporos nao deram sinal de vida ( 4 dias) mas nesta placa logo no segundo dia o suposto micélio está aparecendo. Mas ainda estou na duvida se realmente é micélio ou alguma contaminação.

( 4 dias mais ou menos )

( 4 dias mais ou menos )

Um abraço!

 

[Amaral]

Muito cedo para palpitar algo @Mantus, eu arrisco que é micélio de cub.
Micélio de cub. em PDA e boa incubação caminha notavelmente de 24 em 24hrs, já os contaminantes colonizam mais rápido, segue observando

 

[mantonelli]

Raspou os esporos diretamente na placa ou pingou eles utilizando uma seringa?

 

[Mantus]

Fala @mantonelli, tudo bem?

Estas placas, eu usei bisturi e transferi alguns esporos para a placa, coisa do tamanho de uma ponta de caneta.

abs!

 

[mantonelli]

Tem fotos atualizadas dessas placas?

Nas que você postou eu não vejo sinal de micélio e acho bem estranho esse acúmulo de umidade ao redor dos esporos.

Está deixando essas placas viradas, para evitar que a condensação da água pingue no BDA?

 

[Mantus]

Boa noite!

Acho que agora deu uma desenvolvida melhor, teremos mais chances de analisar melhor.
Placa 1

Placa 2

Placa 3


Obrigado!

 

[Amaral]

Alguns pontos já é notável o micélio de cubensis, outros ainda duvidosos!

 

[Insider]

quase certo que é so micelio porai.

Nao tive muito sucesso com PDA...

os focos sempre eram mto fracos e algodoados por algum motivo...

Sabe a receita deste PDA que pegou @Mantus ?

Pressurizou por quanto tempo?

 

[tupy]

acho muito legal trabalhar com placas, se vai conhecendo a íntimo a natureza do micélio, vai pegar bastante o jeito da coisa, depois quando ver no copo de FAI ou em um bulk é outra coisa.

 

[Mantus]

Fala pessoa, tudo bem?

Duas placas desenvolveram bem, mas sem setores rizos, acho que vou repicar estas duas placas saudáveis para outras, para ver se o micélio pega legal. O que acham?

@Insider, segue a receita do PDA:

Potatoes, infusion from 200.000
Dextrose 20.000
Agar 15.000

Pressurização por 30min.



Contaminou!

 

[Cosmik]

Contaminou!

Acontece. Bola para frente.

Você está usando GloveBox, @Mantus? Sugiro que reveja com atenção os seus procedimentos de assepsia.

Já teve sucesso com esse carimbo? Digo, em CL ou algum outro cultivo?

 

[Mantus]

@Cosmik ! Tudo bem?

Nunca fiz CL com este carimbo, mas ja fiz cultivos com ele. Raspei os esporos para o PDA.

Por que? Você acha que está algodoado demais?

Um abraço

 

[Cosmik]

Por que? Você acha que está algodoado demais?

Não, era para saber a procedência do carimbo. É que às vezes ocorre de recebermos carimbos muito contaminados. Por mais que façamos tudo bem limpo, sempre acaba contaminando.

 

[Mantus]

Fala pessoa,,

Como uma placa contaminou, eu segui com as outras duas.

Acho que chegou a hora de repicar para uma placa nova (estou certo? ), eu estou notando que está primeira fase o micélio está bem algodoado, notei também que, o micélio não ficou muito rizo nos potes de pftek que fiz.

Será uma genética enfraquecida? vindo de G2G?

Espero que nas próximas placas elas peguem força e comecem a ficar rizo!

Abs.

 

[Amaral]

Deixa desenvolver mais, isso aumentara a chance de setores rizos começarem a se mostrar, ae sim você pensa em repicagem.
Sobre a genética ser forte ou fraca, por hora é impossivel afirmar!

 

[tupy]

também penso assim, dá uma segurada ainda nessas placas.

 

[Mantus]

Fala pessoal, vamos atualizar!

Fiz a primeira repicagem, foi difícil escolher um setor rizo, o micélio estava bem algodoado.

Mas agora na segunda placa ja da para notar ele ficando mais rizo, acho que mais umas 3 repicagens a coisa fica boa!

abs

 

[Zebu mello]

deixa tomar bem a placa antes de fazer nova biopsia, o miscelio vai mudando enquanto cresce e pode se que la na frente ele fique bem rizomorfico...

 

[tupy]

é isso mesmo, agora é interessante dar uma segurada, dificilmente vai acontecer de contaminar e como o @tchescko falou, deve acontecer algumas mudanças em questão de pouco tempo no micélio, vale a pena esperar e retirar um setor mais bonito.

 

[Mantus]

Exatamente!

Vou deixa-las mais uns 4 dias, vai tomar um bom pedaço, ta começando a ficar forte!

Muito bom trabalhar com isolamento.

Abs!