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Problemático Novo diário (Australian e B+)

Diário de cultivo problemático.
Raças
Australian, B+
Inoculação
22/10/2021
Inoculação via
Cultura líquida
Assepsia (Inoculação)
Gloovebox
Terrário
Geladeira
Técnicas
Tradicional
Substratos
PFTek
Olá, amigos.

Fiz uma receita de 1kg de arroz integral, com 2 litros de vermiculita. PFTek clássica, sem invenções.

Passei a vermiculita por 10 minutos no microondas antes de misturar o arroz. Deixei por 30 minutos o arroz e a vermiculita na lâmpada UVC antes de misturar. Usei apenas água destilada na mistura. Depois de pronta, mais 30 minutos na lâmpada UVC, junto com os potinhos, borrifados com álcool e secos debaixo da lâmpada.

Deu 23 potinhos de 140 ml. Gosto desses potinhos menores, pois se contaminam, perco menos substrato.

Mais 30 minutos de UVC antes de ir pra panela.

Esterilização em panela de pressão por 90 minutos. A panela tá nas fotos.

Depois de frios, no dia seguinte, tirei os potinhos e deixei mais 30 minutos na lâmpada UVC. (nas fotos)

Usei CLs compradas da internet, clonadas através da técnica descrita aqui https://teonanacatl.org/threads/cultura-líquida-rápida-com-soro-glicosado.16048/

Inocluei 10 potinhos com Australian, 10 potinhos com B+. Os outros 3 usei pra testar uns esporos que eu tinha aqui, saber se estão contaminados.

Usei seringas novas de 1 ml, 2 furos de 0,5 ml em cada pote. Cada CL com uma seringa diferente.

Coloquei os 20 numa caixa de isopor, dessas de peixe (restaurante japonês sempre joga fora, só pedir que dão, fica a dica prós colegas).
 

Anexos

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Seria 1 litro de arroz certo? Não 1kg?

Utiliza agua destilada não faz diferença, só gasta teu dinheiro.
Antes de ir para panela de pressão o arroz tem contaminantes, então ao misturar a agua não é mais destilada.
Lampada UVC a mesma coisa, não compensa, gasta energia a toa.
Só e boa para esterilizar aparatos, substratos não funciona tão bem.

Cuidado com a clonagem, é fácil contaminar toda a solução.
A técnica do poeiraviva depende de um manuseamento muito cuidadoso.
Prefiro teks que vão na panela de pressão. (Agua, 3-4% de mel ou karo, 20 minutos na pressão).

Eu gosto de trabalhar com seringas de 10ml, acaba compensando mais.

Sua panela é grande, parece ser profissional da fulgor, que tem 70kpa, é um pouco baixo, mas para PFTEK funciona.
Deixaria pelo menos 1:45 ou até 2:00
Ela também é grande, se uma leva der ruim vai perder muitos copos.

Com cultura liquida seria melhor fazer uma leva de 3-4 copos com panela pequena para testar e não perder dinheiro.

Seria mais seguro utilizar selo de vermiculita, reduz bastante a taxa de contaminação.
Também é melhor deixar um espaço no pote, não preencher todo, porque dificulta a troca de ar interna.

Pote de plástico acaba ficando mais caro a longo prazo, do que copos de vidro com alumínio.
Como esteriliza muitos copos de uma vez, acaba não sendo economia fazer com 140ml, já que são todos da mesma leva com o mesmo inoculante.
Pode perder todos os copos, que daria o mesmo com menos copos maiores.

Pelo que percebi, inoculou pelas laterais, o ideal seria por cima, para permitir a troca de ar.

Agora é esperar e acompanhar para ver como desenvolvem.
 
Seria 1 litro de arroz certo? Não 1kg?

Utiliza agua destilada não faz diferença, só gasta teu dinheiro.
Antes de ir para panela de pressão o arroz tem contaminantes, então ao misturar a agua não é mais destilada.
Lampada UVC a mesma coisa, não compensa, gasta energia a toa.
Só e boa para esterilizar aparatos, substratos não funciona tão bem.

Cuidado com a clonagem, é fácil contaminar toda a solução.
A técnica do poeiraviva depende de um manuseamento muito cuidadoso.
Prefiro teks que vão na panela de pressão. (Agua, 3-4% de mel ou karo, 20 minutos na pressão).

Eu gosto de trabalhar com seringas de 10ml, acaba compensando mais.

Sua panela é grande, parece ser profissional da fulgor, que tem 70kpa, é um pouco baixo, mas para PFTEK funciona.
Deixaria pelo menos 1:45 ou até 2:00
Ela também é grande, se uma leva der ruim vai perder muitos copos.

Com cultura liquida seria melhor fazer uma leva de 3-4 copos com panela pequena para testar e não perder dinheiro.

Seria mais seguro utilizar selo de vermiculita, reduz bastante a taxa de contaminação.
Também é melhor deixar um espaço no pote, não preencher todo, porque dificulta a troca de ar interna.

Pote de plástico acaba ficando mais caro a longo prazo, do que copos de vidro com alumínio.
Como esteriliza muitos copos de uma vez, acaba não sendo economia fazer com 140ml, já que são todos da mesma leva com o mesmo inoculante.
Pode perder todos os copos, que daria o mesmo com menos copos maiores.

Pelo que percebi, inoculou pelas laterais, o ideal seria por cima, para permitir a troca de ar.

Agora é esperar e acompanhar para ver como desenvolvem.
Bora esclarecer, me corrija se eu estiver errado, por favor:

1 - 1 kg de arroz são 5 potes de 250 ml (1, 25 litros) nas medidas. Então coloco 10 potes de vermiculita (2,5 litros). Errei a conta.

2 - Esqueci de mencionar o selo de vermiculita em cima. Passada no microondas por 10 minutos também. Para o selo, uso vermiculita fina. No substrato, a média.

3 - A água destilada usei pra testar. Uso água de galão de 5 litros. Vi que o pessoal comenta sobre a água de copo, mas eu liguei na fábrica e falei com a responsável técnica)química responsável, ela jurou de pé junto que não há nenhuma diferença no processo de envasamento, a água de copo é exatamente a mesma do galãozinho de 5 litros, o que tem alça na embalagem (é bom que esses galões podem virar terrários individuais).

4 - Notei que a água destilada não encharca, mas também não pinga da mão quando vc aperta. O substrato desliza pelos dedos, mas não pinga.

5 - A questão da seringa, já usei de 10 ml, mas minha mão é meio pesada. Se a ideia é de 1 ml por copo, acabo fazendo 8 copos com 10 ml. Por isso fui pra de 1 ml, tentando ser mais certeiro. A de 10 reduziria apenas o tempo de inoculação, já que iria ter uma flambada a menos por copo (a de voltar pra pegar mais inoculante).

6 - Sobre os copos, achei no ML os que tem lacre, conforme vc indicou no outro post. Até tenho deles aqui. São baratos e reutilizáveis, coisa de 0,80 por copo, comprando pacote com 100. Aprendi nos copos de vidro/requeijão, porém quero produzir em escala e os potes de 140, por serem menores, colonizam mais rápido.

7 - Vou seguir sua dica do furo único em cima, na próxima inoculação. E tomar o cuidado de deixar espaço da troca interna.

8 - Pretendo dar uma estudada nas outras técnicas de clonagem. Se tiver link de outra mais fácil,.por favor, mande.

9 - Acredito que em 8-9 dias os primeiros sinais de colonização aparecem. Acho que até sábado, dia 30, tenho novidades aqui.

Obrigado pela atenção, meu caro.
 
Tá profissional, hein.
Vale conferir a pressão da panela. Se for 70 como o Texugo disse, realmente deixar um pouco mais vale a pena. Estou procurando uma de 120 faz tempo, as que achei são caríssimas, enquanto a de 80 tá por 50 reais aqui onde moro (4,5L)
 
2- também é só gasto de energia. Não gosto da fina, eu uso a média para tudo.

3- uso água de copo porque sempre deu certo. Até porque se você abrir uma garrafa, tem que usar todo o líquido de uma vez.
Depois que abriu, já era, contaminada.

5- a de 10 diminuiria o tempo de preparar a seringa, assim como diminuiria a movimentação de ficar sugando.
Inocular é só colocar a agulha, tirar um pouquinho para ter espaço para o líquido sair, se só enfiar a agulha e não voltar um pouco fica muito pesado e realmente não tem como injetar 0,5ml.


8- Tutorial Cultura Líquida
 
Tá profissional, hein.
Vale conferir a pressão da panela. Se for 70 como o Texugo disse, realmente deixar um pouco mais vale a pena. Estou procurando uma de 120 faz tempo, as que achei são caríssimas, enquanto a de 80 tá por 50 reais aqui onde moro (4,5L)
Como faço a medida da pressão da panela?
 
2- também é só gasto de energia. Não gosto da fina, eu uso a média para tudo.

3- uso água de copo porque sempre deu certo. Até porque se você abrir uma garrafa, tem que usar todo o líquido de uma vez.
Depois que abriu, já era, contaminada.

5- a de 10 diminuiria o tempo de preparar a seringa, assim como diminuiria a movimentação de ficar sugando.
Inocular é só colocar a agulha, tirar um pouquinho para ter espaço para o líquido sair, se só enfiar a agulha e não voltar um pouco fica muito pesado e realmente não tem como injetar 0,5ml.


8- Tutorial Cultura Líquida
Valeu pelas dicas, vou dar uma lida nesse tutorial que indicou.
 
Hoje temos os potes de Australian todos com sinais de colonização iniciando, e mais 6 dos B+...
 

Anexos

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À direita, os copos de Australian. Quase todos colonizados, faltando pouco nos 3 da fileira esquerda.

à esquerda, os copos de B+. Estranho que apenas 4 copos (fileira do meio) colonizaram nos 2 furos. Os outros 6 (fileiras laterais) só colonizaram por um dos furos, e por isso, estão mais lentos, ainda na metade dos copos.
Lembrando que usei seringas de 1 ml (insulina) e injetei 0,5 ml em cada furo.

Todos estão numa incubadora que preparei usando o freezer de uma carcaça de geladeira, que estou montando um terrário na parte debaixo (outro tópico)
 

Anexos

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Continuando...
Dia 24 eu aniversário os potes.
A strain Australian eu coloquei num terrário-geladeira, que estou equalizando.
A B+ tá num terrário normal.
Como são 7 bolos de cada, fiz roll em 5, e deixei 2 normais.
 

Anexos

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Só atualizando pra fechar o tópico.
Os B+ na geladeira contaminaram todos.
Os Australian no terrário também.
Na raiva, não fotografei os B+
Os Australian são esses aqui.
 

Anexos

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Olá, amigos.

Fiz uma receita de 1kg de arroz integral, com 2 litros de vermiculita. PFTek clássica, sem invenções.

Passei a vermiculita por 10 minutos no microondas antes de misturar o arroz. Deixei por 30 minutos o arroz e a vermiculita na lâmpada UVC antes de misturar. Usei apenas água destilada na mistura. Depois de pronta, mais 30 minutos na lâmpada UVC, junto com os potinhos, borrifados com álcool e secos debaixo da lâmpada.

Deu 23 potinhos de 140 ml. Gosto desses potinhos menores, pois se contaminam, perco menos substrato.

Mais 30 minutos de UVC antes de ir pra panela.

Esterilização em panela de pressão por 90 minutos. A panela tá nas fotos.

Depois de frios, no dia seguinte, tirei os potinhos e deixei mais 30 minutos na lâmpada UVC. (nas fotos)

Usei CLs compradas da internet, clonadas através da técnica descrita aqui https://teonanacatl.org/threads/cultura-líquida-rápida-com-soro-glicosado.16048/

Inocluei 10 potinhos com Australian, 10 potinhos com B+. Os outros 3 usei pra testar uns esporos que eu tinha aqui, saber se estão contaminados.

Usei seringas novas de 1 ml, 2 furos de 0,5 ml em cada pote. Cada CL com uma seringa diferente.

Coloquei os 20 numa caixa de isopor, dessas de peixe (restaurante japonês sempre joga fora, só pedir que dão, fica a dica prós colegas).


Salve @Rickarddin tô precisando de uma panela desse tamanho pra esterilizar os potes. Cara a minha tem só 3,6 l kkkkk.
 
Salve @Rickarddin tô precisando de uma panela desse tamanho pra esterilizar os potes. Cara a minha tem só 3,6 l kkkkk.

Eu uso 2 PP. Uma de 4 litros e outra um pouquinho maior que esqueci agora. Juntando as duas, dão até 9 copos. Quero dizer... só arrumar mais uma PP que você fica jóia pra uma boa produção Pf Tek de uso pra poucas pessoas. :)
 
Eu uso 2 PP. Uma de 4 litros e outra um pouquinho maior que esqueci agora. Juntando as duas, dão até 9 copos. Quero dizer... só arrumar mais uma PP que você fica jóia pra uma boa produção Pf Tek de uso pra poucas pessoas. :)

Tbm estou fazendo isso usando duas panelas. Mas o preço do gás não tá fácil. Achei umanpanela aqui perto de 10l por 95$ não acreditei no preço. Mas não é uma rochedo nem clock kkkkkk mesmo com duas panelas consigo só 6 potes no máximo de 250ml.
 
Passei a trabalhar com monotube, e faço a pasteurização de substrato no microondas. Tem funcionado bem.
Uso panela só pra fazer spawn.e bolos, uma vez por mês.
 
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