Esse diário propõe testes na utilização de casca de pinus como susbtrato para Psilicybe Cubensis, além do uso da dextrose como complemento/aditivo.
A ideia é promover maior flexibilidade aos cultivos, e encimar o uso de materiais "Lado B" no preparo de substratos.
Confecção da seringa multi-esporos
24/10/2015
Em uma glovebox improvisada, utilizei ¾ de um carimbo para confeccionar 2 seringas de 20ml cada. Com o ¼ restante do carimbo, fiz a inoculação de duas CLs (água + dextrose) e de uma superfície de PDA (agar + Levedo de Cerveja + dextrose + água de batata).
O procedimento foi feito com luvas cirúrgicas esterilizadas, e a raspagem dos exporos foi feita com bisturi esterilizado. 2 seringas, 1 copo de cachaça e 4 ampolas de água de injeção foram utilizados.
As seringas prontas foram guardadas na geladeira.
Preparo do substrato
4 copos de 300ml: Casca de pinus com granulação média (75%) + Arroz 7 grãos (25%) + 2 colheres rasas de Dextrose
Deixei a casca de pinus de molho por algumas horas e, então, eu a fervi por 10 minutos. Escorri, e fervi novamente por mais 10 minutos. Escorri, e lavei em água corrente. Nesse processo, a maior parte da poeira e sujeira foi embora.
Misturei a casca, ainda úmida, ao arroz 7 grãos, inteiro. Adicionei a dextrose, que possui volume é nulo, pois a mesma dissolve com água.
Não adicionei mais que 30ml de água à mistura. Misturei à ela 2 gotas de alcalinizador de aquário.
Esterilização do substrato
Acomodei os quatro copos na PP, com água até a metade dos copos. Eu não os lacrei. Apenas coloquei a tampa de papel alumínio, e apertei.
Desliguei a panela após 50 minutos.
25/10/2015
Inoculação
Em um lavabo limpo, sem correntes de ar, acomodei a GloveBox previamente limpa com álcool de cozinha e a mistura de água + Q-Boa.
A seringa ME utilizada nesse procedimento passou por um período de hidratação de 24 horas.
Os copos foram inoculados com 0,6 à 0,7ml do líquido, injetado em cada um dos 4 furos eqüidistantes. No final das contas, foram utilizados cerca de 2,5ml para inocular cada copo. Eles tiveram seus furos tampados com uma camada de micropore.
Incubação
Todos os copos foram guardados em local escuro, à uma temperatura que varia entre 26 e 30 graus.
02/11/15
No 8° dia de incubação, cada um, dos 4 copos, apresenta um pequeno ponto de desenvolvimento micelial, de cerca de 5mm de diâmetro.
As culturas líquidas e o PDA continuam sem sinal de desenvolvimento.
Temperatura: 26°/28°
03/11/2015
Múltiplos pontos de desenvolvimento micelial podem ser observados em todos os 4 copos.
O micélio se apresenta branco, espesso, e algodoado, com breves sessões rizomóficas.
Temperatura: 28°/30°
06/11/2015
Os copos se encontram com cerca de 15% de colonização. Mais pontos de germinação podem ser observados em dois copos.
Temperatura: 27°/29°
A ideia é promover maior flexibilidade aos cultivos, e encimar o uso de materiais "Lado B" no preparo de substratos.
Confecção da seringa multi-esporos
24/10/2015
Em uma glovebox improvisada, utilizei ¾ de um carimbo para confeccionar 2 seringas de 20ml cada. Com o ¼ restante do carimbo, fiz a inoculação de duas CLs (água + dextrose) e de uma superfície de PDA (agar + Levedo de Cerveja + dextrose + água de batata).
O procedimento foi feito com luvas cirúrgicas esterilizadas, e a raspagem dos exporos foi feita com bisturi esterilizado. 2 seringas, 1 copo de cachaça e 4 ampolas de água de injeção foram utilizados.
As seringas prontas foram guardadas na geladeira.
Preparo do substrato
4 copos de 300ml: Casca de pinus com granulação média (75%) + Arroz 7 grãos (25%) + 2 colheres rasas de Dextrose
Deixei a casca de pinus de molho por algumas horas e, então, eu a fervi por 10 minutos. Escorri, e fervi novamente por mais 10 minutos. Escorri, e lavei em água corrente. Nesse processo, a maior parte da poeira e sujeira foi embora.
Misturei a casca, ainda úmida, ao arroz 7 grãos, inteiro. Adicionei a dextrose, que possui volume é nulo, pois a mesma dissolve com água.
Não adicionei mais que 30ml de água à mistura. Misturei à ela 2 gotas de alcalinizador de aquário.
Esterilização do substrato
Acomodei os quatro copos na PP, com água até a metade dos copos. Eu não os lacrei. Apenas coloquei a tampa de papel alumínio, e apertei.
Desliguei a panela após 50 minutos.
25/10/2015
Inoculação
Em um lavabo limpo, sem correntes de ar, acomodei a GloveBox previamente limpa com álcool de cozinha e a mistura de água + Q-Boa.
A seringa ME utilizada nesse procedimento passou por um período de hidratação de 24 horas.
Os copos foram inoculados com 0,6 à 0,7ml do líquido, injetado em cada um dos 4 furos eqüidistantes. No final das contas, foram utilizados cerca de 2,5ml para inocular cada copo. Eles tiveram seus furos tampados com uma camada de micropore.
Incubação
Todos os copos foram guardados em local escuro, à uma temperatura que varia entre 26 e 30 graus.
02/11/15
No 8° dia de incubação, cada um, dos 4 copos, apresenta um pequeno ponto de desenvolvimento micelial, de cerca de 5mm de diâmetro.
As culturas líquidas e o PDA continuam sem sinal de desenvolvimento.
Temperatura: 26°/28°
03/11/2015
Múltiplos pontos de desenvolvimento micelial podem ser observados em todos os 4 copos.
O micélio se apresenta branco, espesso, e algodoado, com breves sessões rizomóficas.
Temperatura: 28°/30°
06/11/2015
Os copos se encontram com cerca de 15% de colonização. Mais pontos de germinação podem ser observados em dois copos.
Temperatura: 27°/29°
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